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qPCR(實(shí)時(shí)定量PCR)儀是一種高靈敏度的分子生物學(xué)工具,能夠?qū)NA或RNA進(jìn)行定量、定性檢測(cè),廣泛應(yīng)用于科研、醫(yī)療、農(nóng)業(yè)等領(lǐng)域。以下是qPCR儀常見(jiàn)的檢測(cè)項(xiàng)目分類(lèi):
一、基因表達(dá)分析
1、mRNA表達(dá)水平:檢測(cè)特定基因的轉(zhuǎn)錄水平,研究基因功能、信號(hào)通路、疾病機(jī)制等。
示例:癌癥相關(guān)基因、炎癥因子(如IL-6、TNF-α)、干細(xì)胞標(biāo)記物等。
2、非編碼RNA:如miRNA、lncRNA、circRNA的表達(dá)分析,用于表觀遺傳學(xué)研究。
二、病原體檢測(cè)
1、病毒:快速定量病毒載量,如:
HIV、HBV、HCV(病毒性肝炎)
SARS-CoV-2
流感病毒(H1N1等亞型分型)
2、細(xì)菌:檢測(cè)致病菌(如結(jié)核分枝桿菌、沙門(mén)氏菌、耐藥菌基因)。
3、真菌/寄生蟲(chóng):如白色念珠菌、瘧原蟲(chóng)等。
三、基因突變與多態(tài)性分析
1、SNP(單核苷酸多態(tài)性):用于遺傳病風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估、藥物代謝基因分型(如CYP450家族)。
2、突變檢測(cè):如癌癥驅(qū)動(dòng)突變(EGFR、KRAS、BRAF)、遺傳病相關(guān)突變(囊性纖維化CFTR基因)。
四、轉(zhuǎn)基因與食品安全
1、轉(zhuǎn)基因成分(GMO)檢測(cè):如大豆、玉米中轉(zhuǎn)基因序列的定量。
2、食源性病原體:如大腸桿菌O157:H7、李斯特菌等。
五、表觀遺傳學(xué)
1、DNA甲基化:通過(guò)甲基化特異性qPCR(MSP)檢測(cè)啟動(dòng)子甲基化狀態(tài)(如腫瘤抑制基因)。
2、染色質(zhì)修飾:結(jié)合ChIP-qPCR分析組蛋白修飾。
六、環(huán)境與微生物組學(xué)
1、環(huán)境微生物:檢測(cè)水體、土壤中的特定微生物(如降解污染物的細(xì)菌)。
2、腸道菌群:定量特定菌種(如雙歧桿菌、擬桿菌)。
七、技術(shù)擴(kuò)展
1、多重qPCR:同時(shí)檢測(cè)多個(gè)靶標(biāo)(需不同熒光標(biāo)記探針)。
2、數(shù)字PCR(dPCR):更高精度的絕對(duì)定量,適用于低豐度靶標(biāo)。
qPCR儀的高通量、高靈敏度使其成為分子診斷和基礎(chǔ)研究的核心設(shè)備,具體項(xiàng)目需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康脑O(shè)計(jì)檢測(cè)方案。