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比色皿(Cuvette)是實驗室中用于光學分析的關鍵器件,主要用于測量液體樣品的吸光度、透光率或熒光強度等光學參數(shù)。以下是其詳細用途和注意事項:
一、比色皿主要用途
1、紫外-可見分光光度法(UV-Vis):測量溶液在特定波長下的吸光度,用于定量分析(如濃度測定)或定性分析(如物質(zhì)鑒定)。
2、應用場景:DNA/RNA濃度檢測(260nm)、蛋白質(zhì)檢測(280nm或Bradford法)、酶動力學實驗等。
3、熒光光譜分析:特殊石英比色皿用于激發(fā)和檢測熒光信號,適用于高靈敏度檢測(如熒光標記物、量子點等)。
4、其他光學檢測:可用于濁度測量、化學發(fā)光分析或動態(tài)光散射(DLS)等。
二、比色皿的類型與選擇
1、石英
材質(zhì):熔融石英
適用波長范圍:190~2500nm
典型應用:紫外區(qū)檢測(如DNA、蛋白質(zhì))
2、光學玻璃
材質(zhì):硼硅酸鹽玻璃
適用波長范圍:340~2500nm
典型應用:可見光區(qū)檢測(如比色法)
3、塑料
材質(zhì):聚苯乙烯/丙烯酸
適用波長范圍:340~800nm
典型應用:教學實驗或一次性使用(成本低)
4、熒光專用
材質(zhì):石英(四面透光)
適用波長范圍:根據(jù)熒光波長選擇
典型應用:熒光光譜分析
三、使用注意事項
1、清潔與保存
使用后立即用蒸餾水或適當溶劑(如乙醇)沖洗,避免樣品干涸。
指紋或劃痕會影響透光率,需用鏡頭紙或軟布擦拭。
長期存放時避免疊放,防止磨損。
2、操作規(guī)范
手持比色皿的磨砂面,避免接觸透光面。
裝入液體體積不超過2/3,避免溢出污染儀器。
檢測前用待測溶液潤洗2~3次,減少誤差。
3、兼容性檢查
確保比色皿與儀器光路匹配(如1cm標準光程最常見)。
熒光實驗需選擇低自發(fā)熒光的比色皿。
四、常見問題
1、誤差來源:
劃痕、污漬或氣泡(需輕彈比色皿排除氣泡)。
不同比色皿間的透光差異(建議同一實驗使用同一組比色皿)。
2、損壞跡象:
透光面霧化、裂紋或刻度模糊需立即更換。
比色皿的正確選擇和使用直接影響實驗數(shù)據(jù)的準確性,需根據(jù)實驗需求嚴格匹配材質(zhì)和規(guī)格。